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可見分光光度計樣品分析方法及操作指南

可見分光光度計樣品分析方法及操作指南

一、樣品分析方法

1. ?標準曲線法?

?標準溶液配制?:配制5-8個不同濃度的標準溶液(濃度范圍需覆蓋待測樣品預期值),按梯度稀釋并貼標防止混淆?。

?顯色處理?:部分樣品需加入顯色劑(如總磷檢測需鉬酸銨顯色)后靜置至反應?。

?吸光度測定?:在特征吸收波長下(如總磷檢測用697nm)測量標準溶液吸光度,繪制濃度-吸光度標準曲線?。

2. ?直接比較法?

?單點校準?:適用于已知線性關系的樣品,用單一標準溶液計算樣品濃度(公式:

?樣=?樣?標×?標C 樣 = A 標A 樣×C 標)?。

二、操作流程

1. ?實驗準備?

?儀器檢查?:確認分光光度計處于穩定環境(溫度15-30℃,濕度≤70%),清潔樣品室及比色皿?。

?試劑準備?:配制空白溶液(如蒸餾水或溶劑)及待測樣品,確保無懸浮物?。

2. ?儀器校準與參數設置?

?開機預熱?:接通電源后預熱≥10分鐘(部分型號需30分鐘),避免基線漂移?。

?波長設定?:通過控制面板輸入特征波長(如總磷用697nm)或按<GOTO λ>鍵直接跳轉?。

?基線校正?:放入空白溶液,按<AUTO-ZERO>或<ABS%>鍵調零?。

3. ?樣品檢測?

?裝樣要求?:液體樣品需澄清(必要時過濾),裝入比色皿至3/4高度,外壁用擦鏡紙清潔?。

?測量步驟?:

將空白溶液放入光路,按<100%T>鍵調滿度?。

依次放入標準溶液和待測樣品,記錄吸光度值(按<START/STOP>鍵讀數)?。

?重復測量?:每個樣品至少測3次,取平均值以提高精度?。

4. ?數據分析?

?標準曲線擬合?:使用儀器軟件或手動計算線性回歸方程(y=kx+b),計算樣品濃度?。

?結果驗證?:通過加標回收率或平行樣檢測驗證數據可靠性?。

三、關鍵注意事項

?波長準確性?:定期用標準濾光片(如鈥玻璃)校準波長,誤差需≤±1nm?17。

?比色皿使用?:

玻璃比色皿僅適用于可見光區(350-1000nm),使用前后用乙醇清洗?。

避免用手直接接觸光面,防止指紋影響透光率?。

?干擾排除?:

渾濁樣品需離心或過濾,避免懸浮物散射光?。

共存物質干擾可通過雙波長法或背景扣除消除?。

四、故障處理

?問題

?解決方法

吸光度讀數不穩定

檢查電源穩定性,延長預熱時間;清潔比色

基線無法調零

更換空白溶液或檢查光路遮擋

透射比超100%

透射比超100%

 


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TEL:13798128437

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